遺伝子/核酸導入試薬 各種データページ
LipoTrust™ EX
LipoTrust™ EX Oligo
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siRNA，antisense DNA，miRNA等 short oligonucleotides トランスフェクション試薬
LipoTrust™ EX Oligo
- Luciferase遺伝子を保持するHeLa細胞に、40nM anti-Luciferase siRNA をトランスフェクションした際のノックダウン効率。バーの高さはLuciferase活性を0までノックダウンしたときを効率100％とした場合の値を示す。各トランスフェクション試薬の添加量は、各社プロトコルに従った。
- Data1の試験時において他社競合製品および LipoTrust™ EX Oligoを用いた場合の Luciferase 活性測定直前の細胞の状態。
- Caco-2細胞に他社競合製品 またはLipoTrust™ EX Oligo を用いてFITCラベルしたScrambled siRNA を導入し、48時間後にFCM（フローサイトメトリー）にて解析を行った。オレンジ色のラインは何もトランスフェクションしていない細胞の状態を示す。
- LipoTrust™ EX Oligoを用いて、FITCラベルした Scrambled siRNA をHeLa細胞へ導入し、24時間後に撮影を行った。
- 96well プレートを用い、Luciferase遺伝子を保持するHeLa細胞に、anti-Luciferase siRNA 濃度および LipoTrust™ EX Oligo 濃度を毒性が現れない範囲でさまざまに設定し導入を行った。バーの高さは導入を行わない場合の Luciferase 活性を100％としたときの値を示している。
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細胞種
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適正
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| HeLa細胞 | ◎ |
| CHO細胞 | ◎ |
| KB細胞 | ◎ |
| HT1080細胞 | ○ |
| 3T3-L1細胞 | ○ |
| COS-1細胞 | ◎ |
| Caco-2細胞 | ○ |
LipoTrust™ EX Gene
Plasmid DNA トランスフェクション試薬
LipoTrust™ EX Gene
- 他社競合製品（ReagentⅠ～Ⅵ）よりも優れたトランスフェクション効率を示します。
- HeLa 細胞以外の様々な細胞（293 細胞、G2 細胞、313-L1 細胞、CHOK1 細胞、HT1080細胞）でも高いトランスフェクション効率が確認されました。
Plasmid DNA (β– ガラクトシダーゼ遺伝子) を各種細胞にLipoTrust™ EX Gene と他社競合製品をそれぞれトランスフェクションしたのち、24 時間後に行ったβ-ガラクトシダーゼ活性測定結果を示す。
- ※ 測定結果は LipoTrust™ EX Gene の活性値を1 とした場合の結果をあらわす。
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細胞種
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適正
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| HeLa細胞 | ◎ |
| HT1080細胞 | ◎ |
| NB1RGB細胞 | ○ |
| 293T細胞 | ◎ |
| COS-1細胞 | ◎ |
LipoTrust™
各種データページ
- 取扱説明書ダウンロード
- MSDS ダウンロード： SR , PE , CH
O,O’-ditetradecanoyl-N-(α-trimethylammonioacetyl)diethanolamine chloride (DC-6-14)
5％FBSを含む培地中にさらした場合のリポソームの形状変化を示す。市販品では15min 血清添加培地中にさらされると微粒子構造が消失しているが、LipoTrust™ SRでは1h 後であっても球状の形状を保ったままであることがわかる。
10％FBS添加培地中においてLipoTrust™ SRと各種市販品のリポソームを用いてHRA(ヒト卵巣癌)細胞へルシフェラーゼ遺伝子の導入をおこない、ルシフェラーゼ活性を測定した結果を示す。
LipoTrust™ SRは各種市販品と比較しても非常に高い遺伝子発現効率を示していることがわかる。
10％FBS添加培地中においてLipoTrust™ SRと各種市販品のリポソームを用いてLacZ遺伝子の導入をおこない、LacZ陽性細胞数をカウントした結果を示す。
LipoTrust™ SRは各種市販品と比較しても非常に高い遺伝子発現効率を示していることがわかる。
無血清培地中において、ルシフェラーゼアッセイを行った結果を示す。
無血清培地中では LipoTrust™ CH の遺伝子発現効率が高いことがわかる。
| Type of Liposomes |
% of transfected cells
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LipoTrust™ SR
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1.00±0.11
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製品A
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0.38±0.26
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製品B
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0.62±0.21
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製品C
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0.23±0.23
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mEIIL細胞をヌードマウス腹腔内に５×10６個接種し、3週間後にリポソーム / CAG-LacZ遺伝子（20μｇ）を1ｍl マウス腹腔内に投与し、翌日腹腔内より回収した細胞のLacZ陽性細胞率を示す。
LipoTrust™ SR は各種市販品と比較して高い遺伝子発現効率を示すことがわかる。
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細胞種
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導入効率
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細胞種 | 導入効率 |
| 293 | ◎ | HRA | ◎ |
| 3T3 | ○ | Jurkat | ○ |
| A431 | ○ | MDCK | ○ |
| A549 | ○ | ｍEIIL | ◎ |
| B95a | ○ | Morris | ◎ |
| C33A | ○ | Neuro-2A | ◎ |
| COS-1 | ○ | PC3 | ○ |
| COS-7 | ◎ | RBL-2H3 | ◎ |
| ES | ◎ | Walker-256 | ◎ |
| H322 | ○ | マウス繊維芽細胞 | ◎ |
| H520 | ○ | マウス顆粒神経細胞 | ◎ |
| HeLa | ◎ | 牛血管内皮細胞 | ○ |
| HepG2 | ○ | 背側神経根細胞 | ◎ |
参考文献
Rai K,Takigawa N, Ito S, Kashihara H, Ichihara E, Yasuda T et al.
Liposomal Delivery of MicroRNA-7-Expressing Plasmid Overcomes Epidermal Growth Factor Receptor Tyrosine Kinase Inhibitor-Resistance in Lung Cancer
Cells. Mol Cancer Ther. 2011;10(9):1720-7
Efficient delivery of liposome-mediated MGMT-siRNA reinforces the cytotoxity of temozolomide in GBM-initiating cells T Kato, A Natsume et al.
Gene Therapy, 1-9 (2010)
Knocking down barriers:advances in siRNA deliveryKathryn A. Whitehead, Robert Langer and Daniel G. Anderson Nature Review siRNA delivery 129-138
Poster #1396: MicroRNA-7 downregulates epidermal growth factor receptor in both gefitinib-sensitive and resistant lung carcinoma cells: presented by Kammei Rai et al 100th AACR in April 19, 2009.
Resolution of liver cirrhosis using vitamin A-coupled lipos Development of novel cationic liposomes for efficient gene transfer into peritoneal disseminated tumor.
Hum. Gene Ther.,10,947-955 (1999)
Development of novel cationic liposomes for efficient gene transfer into peritoneal disseminated tumor.
Hum. Gene Ther.,10,947-955 (1999)
Gene delivery using liposome technology.
J. Control.Release, 62,269-277(1999)
A new cationic liposome for efficent gene delivery with serum into cultured human cells: A quantitative analysis using two independent fluorescent probes.
Biochim.Biophys.Acta,1467,419-430(2000)
Characteristics and biodistribution of cationic liposomes and their complexes.
J.Control.Release,69,139-148(2000)
Phorbol ester-potentiated liposomal transfection to monocytic PLB-985 cells.
J.Biochem.,128,989-998(2000)
Quantative analysis of correlation between number of nuclear plasmids and gene expression activity after transfection with cationic liposomes.
Pharm.Res.,19,377-381(2002)
PU.1 is dominant and HAF-1 supplementary for activation of the gp91phox promoter in human monocytic PLB-985 cells.
J.Biochem.,131.533-540(2002)
Norepinephrine enhances fibrosis mediated by TGF-
in cardiac fibroblast.
Hypertension,40,148-154(2002)
“ナノテクノロジーとしてのリポソーム製剤：過去、現在、未来(後編）”
PHARM TECH JAPAN,19,419-433(2003)
“ステルスリポソームの癌化学療法/遺伝子治療法への応用”
Biotherapy,18,353-360(2004)
Ultrasound enhances liposome-mediated gene transfection.
Ultrasound Sonochemistry,Accepted.
